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实操技巧 | 超详细的冻存PBMC复苏技术指南视频来啦!

2023.06.20

作为药物研发的最佳搭档,外周血单个核细胞(PBMC)被广泛应用于药物发现/开发、分析验证/开发及其他免疫学相关研究中。


而冻存PBMC相较于新鲜PBMC又有以下几点优势:


  • 方便存储和运输冻存PBMC可以长期保存,不受时间和地点限制,方便运输。

  • 批次一致性冻存PBMC可以在同一批次内进行多次实验,有助于结果的准确性和可重复性。

  • 减少人员和时间成本冻存PBMC可以事先准备,减少样本采集和处理的人员和时间成本。

  • 定性更好冻存PBMC可以在低温下保存,可以更好地保护细胞完整性和功能,减少细胞死亡和变性的风险。


实操技巧 | 复苏技术全指南



如何高效利用冻存PBMC

最大化还原冻存PBMC的活率与数量

复苏技巧是重中之重

作为专业提供PBMC分离服务的妙顺生物

录制了PBMC复苏指导视频

以便大家获取最好的复苏结果

实操技巧 | 超详细的冻存PBMC复苏技术指南视频来啦!(图1)

所需试剂耗材及设备

缓冲液:

PBS或DPBS、0.5% HSA或FBS(比例视需求可调整)。


其他:

75%酒精、15ml离心管、50ml离心管、巴氏滴管、止血钳、一次性无菌薄膜PE手套。


设备:

恒温水浴锅、生物安全柜、微量移液器、离心机。


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复苏技术指导视频


FAQ | 更多常见问题解答您的疑问



Q:冻存PBMC及亚型细胞复苏操作上应注意哪些细节?

A:37℃预热复苏培养基或buffer、水浴锅解冻要注意管内细胞融化状态、离心(离心力和时间)参数设置、细胞液重悬后稀释至最适检测浓度进行细胞计数和活率检测。


Q:冻存细胞在运输环节如何保证质量?

A:妙顺生物TPCS提供的冻存细胞服务按照客户需求秉承快速、不计成本、负责的服务宗旨,内部具有完善的供应链体系全程监控,确保细胞样本高质量地送到客户手中,为客户带来便捷高效的用户体验。


Q:PBMC及亚型可以传几代?

A:PBMC及其亚型细胞都是可增殖不可传代,扩增倍数与Donor有关,不同Donor的细胞状态和增殖能力不同,细胞扩增倍数也不同。


Q:PBMC及其亚型是激活过的细胞吗?

A:是未激活的。客户如果需要做增殖实验,需要添加激活或细胞因子进行激活。


Q:复苏的细胞不贴壁怎么办?

A:收到细胞后储存条件是否正确,是否使用推荐培养基、培养器皿及包被材料,是否按照说明书操作,客户需拍照取证后联系技术支持。


Q:复苏的细胞被污染了怎么办?

A:显微镜观察后,一旦发现污染,需要确认污染源,并及时做出处理,如果出现大规模污染的话最好立即废弃处理污染细胞,避免培养箱内的其他细胞出现交叉污染,同时对整个无菌室消毒后再使用。


Q:冻存管中液体体积都不相同?是否是产品质量问题?

A:不同批次产品由于分装数目不同导致的体积也不相同,但是管中细胞数都是符合规格的,不属于质量问题,若还有疑问,建议复苏后计数。





提供专业化细胞分离服务

助力肿瘤免疫药物开发与研究!


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外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC),其主要包括两大类细胞,分别是淋巴细胞(Lymphocyte)和单核细胞(Monocyte),其中淋巴细胞又包括T淋巴细胞,B淋巴细胞和NK细胞。


妙顺生物TPCS®提供从hPB Leukopak中使用密度梯度离心法分离纯化的PBMC。



服务详情

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*更多规格可订制,详询妙顺生物销售部



交付标准

外观标准:标签明确,标有服务编码及细胞基本信息;包装应完整,无液体渗漏。


微生物:仪器培养法无菌检测结果阴性;支原体检测结果阴性;无菌检测结果阴性;HBV、HCV、HIV、TP、HTLV、B19、EB病毒检测结果阴性。


细胞纯度标准:单个核细胞占总细胞比例≥90%。


细胞活率标准:双荧光AO/PI仪器计数法检测细胞活率≥90%。


细胞数目标准:双荧光AO/PI仪器计数法检测细胞数目≥细胞标签规格。


其他:流式细胞术检测数据Fresh细胞分离完毕24h内送达指定地点。



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妙顺生物

咨询热线:021-64169739

咨询邮箱:sales@miles-bio.com